化验室常用染色液配制

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一、常用染色液的配制

　　⒈ 碘-碘化钾(I2-KI)溶液 能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。

　　配方：碘化钾2g ; 蒸馏水300ml ; 碘1g

　　先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。

　　⒉ 苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ) 能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。

　　配方：(1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉0.1g ; 95%酒精10ml ; 过滤后再加入10ml甘油

　　(2)先将0.1g苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。

　　(3)苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。

　　⒊ 1%醋酸洋红(aceto carmine) 酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。

　　配方：洋红1g ; 45%醋酸100ml

　　煮沸2h左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，然后冷却过滤，加入4%铁明矾溶液1～2滴(不能多加，否则会发生沉淀)，放入棕色瓶中备用。

　　⒋ 改良苯芬品红染色液(Carbol fuchsine) 核染色剂。

　　配制步骤： 先配成三种原液，再配成染色液。

　　原液A：3g碱性品红溶于100ml 70%酒精中。

　　原液B：取原液A10ml加入到90ml 5%石炭酸水溶液中。

　　原液C：取原液B 55ml，加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林(38%的甲醛)。

　　(原液A和原液C可长期保存，原液B限两周内使用)

　　染色液：取C液10～20ml，加45%冰醋酸80～90ml，再加山梨醇1~1.8g，配成10%～20%浓度的石炭酸品红液，放置两周后使用，效果显著(若立即用，则着色能力差)。

　　适用范围：适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，保存性好，使用2～3年不变质。山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用，假如没有山梨醇也能染色，但效果较差。

　　⒌ 中性红(neutral red)溶液 用于染细胞中的液泡，可鉴定细胞死活。

　　配方：中性红0.1g ; 蒸馏水100ml

　　使用时再稀释10倍左右。

　　⒍ 曙红Y(伊红，eosin Y)酒精溶液 常与苏木精对染，能使细胞质染成浅红色，起衬染作用。

　　配方：曙红0.25g ; 95%酒清100ml

　　也常用于95%酒精脱水时，加入少量曙红溶液，其目的是在包埋、切片、展片、镜检时便于识别材料。

　　⒎ 钌红(ruthenium red)染液 钌红是细胞胞间层专性染料，其配后不易保存，应现用现配。

　　配方：钌红5～10mg ; 蒸馏水25-50ml

　　⒏ 龙胆紫(gentian violet) 为酸性染料，适用于细菌涂抹制片。

　　配方：龙胆紫0.2~1 g ; 蒸馏水100ml

　　⒐ 苯胺兰(aniline blue)溶液 为酸性染料，对纤维素细胞壁、非染色质的结构、鞭毛等，尤其是染丝状藻类效果好。还多用于与真曙红作双重染色，对于高等植物多用于与番红作双重染色。

　　配方：苯胺兰1 g ; 35%或95%酒精100ml

　　⒑ 间苯三酚(phloroglucin)溶液 用于测定木质素。

　　配方：间苯三酚5g ; 95%酒精100ml

　　注：此溶液呈黄褐色即失效。

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