生活饮用水中菌落总数验证报告

生活饮用水中菌落总数验证报告

1. 检验标准： GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法 微生物指标 

2．验证项目：菌落总数

3．合格标准：试验组的菌回收率不得低于70%。（试验组菌数-供试品对照组菌数）÷菌液

组≥ 70%

4．实验材料：

4.1 高压蒸汽灭菌器

4.2 干热灭菌箱

4.3 培养箱36℃±1℃

4.4 电炉

4.5 冰箱

4.6 天平

4.7 pH计或精密pH试纸

4.8 灭菌试管、平皿（直径9cm）、刻度吸管、采样瓶等。

5.菌液制备：

5.1 取大肠埃希氏菌(ATCC 25922)、金黄色葡萄球菌（ATCC 25923）菌种第 3代～5 代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物（18h～24h），分别用 5.0mL 吸管吸取 3.0 mL～5.0mL 稀释液加入斜面试管内，反复吹吸，洗下菌苔，制成混合菌液。随后，用 5.0mL 吸管将洗液移至另一无菌试管中，用电动混合器混合（振荡）20s，或在手掌上振敲 80 次，以使细菌悬浮均匀。

5.2 初步制成的菌悬液，先用血球计数板测显微计数其含菌浓度，然后以稀释液稀释至所需使用的浓度。

6.培养基和试剂的制备：

6.1 营养琼脂培养基：称取营养琼脂干粉培养基33g，溶于1000mL蒸馏水中，加热溶解，分装，121℃高压灭菌15min。

6.2 无菌生理盐水：称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15min。

7. 饮用水中细菌总数的测定方法验证

验证试验进行 3次独立的平行试验，并分别计算各试验菌每次的回收率。

7.1  试验组：取水样1mL和30～300cfu试验菌，分别注入平皿中，立即倾注

15～20mL冷却到46℃左右的营养琼脂培养基，旋转平板，将培养基与样液充分混合，待培养基凝固后，翻转平皿，置36℃±1℃的培养箱中培养48h，并做平行样。

7.2. 菌液组：取1ml菌液浓度为30～300cfu/mL试验菌测定所加的试验菌数，做平行样。

7.3. 供试品对照组：取水样1mL，按菌落总数平板计数方法测定供试品本底菌数。

7.4. 结果见表

试验组细菌平板计数（回收率%）

7.5．结论：在3次独立的平行试验中，采用培养基稀释法，回收率均大于 70% ，本次验证共进行三次，在相同的检验条件下，检验结果均符合规定。

8．是否对方法偏离？

否

9．结论：

生活饮用水中菌落总数的检测符合标准《GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法 微生物指标》的要求

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