BCO 比色法
1、方法提要
试料用酸分解,在pH8.4-9.8氨性介质中,以柠檬酸铵为络合剂,铜与BCO生成蓝色络合物,于分光光度计上,波长610nm处,测量吸光度。
2 、试剂仪器
2.1 盐酸(p1.19g/ml);
2.2 硝酸(p1.40g/ml);
2.3 硫酸(1+1);
2.4 盐酸(1+1);
2.5 柠檬酸铵溶液(10%);
2.6 氢氧化铵(1+1);
2.7 氢氧化铵-氯化铵缓冲溶液(pH9.3-9.4):称取40g氯化铵,加入40ml氢氧化铵,用水稀释到1l ,摇匀
2.8 BCO溶液(0.20%):称取2.0g BCO溶解于500ml乙醇及500ml热水中,温热溶解,用水稀释至1000ml(必要时过滤)
2.9 铜标准贮存溶液:称取0.5000g金属铜(99.99%),置入250ml烧杯中,盖上表皿,沿杯壁加入20ml硝酸及20ml水,加热,待全部溶解后,蒸发至5-8ml,加入10ml硫酸(1+1) 继续蒸发至冒三氧化硫白烟,取下稍冷,加水使铜盐溶解,冷却,用水洗去表面皿,移入500ml容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。此溶液1ml含1.0mg铜
2.10 铜标准溶液:移取25.00ml铜标准贮存溶液,置于250ml容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。此溶液1ml含100ug铜
2.11 铜标准溶液:移取50ml铜标准溶液(1ml含100ug铜),置于250ml容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。此溶液1ml含20ug铜
2.12 分光光度计
3、分析步骤
铜量% |
试料g |
分取试液体积ml |
≤0.10 |
1.0000 |
20.00 |
0.10-0.50 |
0.5000 |
10.00 |
0.50-1.00 |
0.2000 |
10.00 |
1.00-2.00 |
0.2000 |
5.00 |
≥2.00 |
0.1000 |
5.00 |
随同试料做空白试验。
3.1 将试料置于100ml烧杯中,加入15ml盐酸,盖上表皿,置电热板上加热5-10min,使硫化氢逸出,然后加入5ml硝酸,继续加热至试料全部溶解(如有黑色残渣可加入数滴氢氟酸或少量氟化铵助溶),取下稍冷后加入2ml硫酸(1+1)并以水冲洗杯壁,洗去表面皿, 加热蒸发至白烟冒尽,趁热加入5ml盐(1+1)20ml水煮沸,使盐类溶解,冷却,移入50nl容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,澄清。此为A液。
3.2 根据试料含铜量,按表移取5.0-20ml试液(A液),置于50ml容量瓶中。加入5ml柠檬酸铵溶液,相应加入0.5-2.0ml氢氧化铵(1+1)加10ml氢氧化铵-氯化铵缓冲溶液,5mlBCO溶液,用水稀释至刻度,摇匀。于分光光度计上,波长610nm处,用0.5-2.0cm比色皿,以试剂空白作参比,测量吸光度。同时进行标准系列的测定。(显色后色泽在5-120min内稳定,若室温低于10℃ 应放置20min后测定)。
4、工作曲线的绘制
移取0/1.00/2.00/3.00/4.00/5.00ml铜标准溶液(试料含铜量在0.10%以下时,用1ml 含20ug铜标准溶液),分别置于一组50ml容量瓶中,以下按分析步骤进行测定,以铜量为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制工作曲线。